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PCR在胃癌的基因诊断中有独特价值

来源:抗癌在线 作者:e医生 时间:2010-03-26 13:58:54 浏览次数: 20

    胃癌的诊断直接影响治疗方案的确定和胃癌患者预后的预测,目前胃癌的诊断方式很多,但基因诊断是国际上很权威的诊断,PCR是基因诊断的核心技术。由于它具有快速、特异、敏感的特点,在临床诊断中具有无比广阔的应用前景。胃癌的发生、发展过程中伴有多种癌基因及抗癌基因的变化,多基因表达异常同时检测对胃癌早期诊断、鉴别诊断和恶性程度的判断具有重要意义;特别是多重PCR完全能够实现多基因多表达同时检测,对胃癌的诊断具有更大的意义。其次,胃癌的浸润与转移是恶性肿瘤的重要特征,也是胃癌患者死亡的主要原因,许多胃癌患者虽切除了原发肿瘤,甚至连常规病理学等检查为转移阴性的患者,仍死于肿瘤的复发转移。
    近研究表明,胃癌的预后与淋巴结转移、肝转移、肿瘤大小、病理分级分型有关,其中淋巴结转移是胃癌患者预后的很主要指标,有无淋巴结转移患者5年生存的可能统计学上有显著性差异(P<0.01),因此检测胃癌患者有无淋巴结转移对胃癌治疗具有重要的现实意义。 肿瘤的浸润与转移是一个多阶段过程。肿瘤细胞的脱落,侵袭并进入循环,仅是这一过程的很初阶段,但仅有少数病人形成转移灶,这种循环癌细胞转移的无效性可能是由于它们在循环中因机械、免疫等原因被消灭 ,同时残余的癌细胞还必须获得转移所需的遗传信息,如细胞调节机制改变,蛋白酶分泌,诱发血管生成,增加细胞运动等,一个癌细胞同时积累这些遗传改变的机会应是很稀少的,因此,转移的机理还需进一步研究。但是,少量癌细胞的存在常常是肿瘤复发与转移的基础。
    因此,为了发现治疗后具高复发风险的肿瘤患者,采用更为敏感的微量肿瘤细胞检测技术是十分必要的,PCR技术是完全能够实现这一目标的。应用PCR技术从外周血、骨髓或淋巴结中检出少量肿瘤细胞有两种策略:一是检出肿瘤细胞中基因突变、染色体重排而产生的稳定性DNA异常,这一方法检测肿瘤细胞的敏感性为1×10-6左右,比Southern杂交提高104倍,二是应用RT-PCR技术扩增组织或肿瘤特异性mRNA,而它们在被检测的组织中呈高表达,目前检测实体瘤的微转移多用此法,其敏感性在1×10-6左右。
    目前认为,用RT-PCR检测出微转移的患者多处于疾病进展期,当局部病变或治疗控制病情后则多为阴性,因此,微转移不仅是一个不良预后指标,而且还可作为治疗结果和早期复发监测的指标 。应用PCR检测胃癌患者的微转移,受到缺乏胃癌特异性基因和高表达标记的限制,到目前为止,没有一种基因在全部胃癌组织中呈异常改变;同时还受到PCR技术本身的限制,一是因该方法高度敏感,可因上述原因出现假阳性:? 受检组织污染少量癌细胞或上皮细胞;- 基因组DNA的污染;? 待检组织低水平表达组织特异性mRNA,二是RNA易被RNA酶降解而出现假阴性。解决上述问题可采用针对性措施:? 寻找胃癌中呈特异表达的基因并运用于临床;- 操作过程小心,防止污染;? 对检测组织优化PCR反应条件;ˉ 设计含有内含子参照基因的扩增产物,既可区别以DNA为模板的扩增产物,又可证明RNA样品的完整。
    尽管PCR在胃癌基因诊断应用方面受到一些限制,但随着癌细胞特异标志基因发现和增加反应特异性技术的不断进展,它将是检测胃癌微转移很令人瞩目的方法,并有着良好的临床应用前景。 

* 温馨提示:本院案例真实有效,只供业内专业人士研究使用,不作为用药指导和对患者的承诺保障。

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