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RNA干扰骨髓基质细胞衍生因子表达对共培养Jurkat细胞增殖及凋亡的影响
http://www.wd999.com 2006-9-14 17:26:34
(重庆)为了探讨阻抑骨髓基质细胞衍生因子(SDF-1)表达对与其共培养的Jurkat细胞增殖、凋亡的影响,研究者脂质体介导SDF-1特异性RNA干扰质粒转染培养的急性白血病骨髓基质细胞,G418筛选阳性克隆(A组),采用ELISA法检测SDF-1表达变化;与Jurkat细胞共培养,绘制生长曲线并计算倍增时间,用流式细胞术检测细胞周期,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺失末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达。以未转染急性白血病骨髓基质细胞(B组)及正常骨髓基质细胞(C组)作为对照。结果A组骨髓基质细胞培养上清SDF-1含量为(384±41)pg/ml,较B组[(2474±271)pg/ml]、C组[(1324±154)pg/ml]明显降低。与之共培养的Jurkat细胞,A组与B组、C组比较,细胞增殖速度减缓,倍增时间延长,细胞周期分析G0/G1期细胞比例增多,S期细胞减少,G2/M期细胞增多;细胞凋亡率增加;PCNA、Bcl-2、Fas表达减少,Bax、FasL表达增多。可见阻抑SDF-1表达在一定程度上抑制与骨髓基质细胞共培养的Jurkat细胞的增殖活性,并促进其凋亡。
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